การชักนำและเพิ่มปริมาณเอ็มบริโอโดยการเพาะเลี้ยงเซลล์แขวนลอยของปาล์มน้ำมันลูกผสมเทเนอรา และการตรวจสอบความแปรปรวนโดยใช้เครื่องหมายอาร์เอพีดี

Abstract

การขยายพันธุ์ปาล์มน้ำมันลูกผสมเทเนอราโดยการกระตุ้นให้เกิดเอ็มบริโอเจนิคแคลลัสบนอาหารแข็ง สูตร MS ที่เติมสารควบคุมการเจริญเติบโตที่แตกต่างกัน พบว่า dicamba เข้มข้น 0.3 มิลลิกรัมต่อลิตร ที่เติมกรดแอสคอร์บิกเข้มข้น 200 มิลลิกรัมต่อลิตร ในสภาพการให้แสง 14 ชั่วโมงต่อวัน ที่อุณหภูมิ 27 ±2 องศาเซลเซียส ส่งเสริมการชักนำแคลลัส 315 มิลลิกรัมต่อน้ำหนักแคลลัสเริ่มต้น หลังจากการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 1 เดือน หลังจากนั้นย้ายแคลลัสดังกล่าวลงในอาหารเหลว 2 สูตร เป็นเวลา 1 เดือน พบว่าอาหารเหลวสูตร MS ที่เติม dicamba เข้มข้น 0.3 มิลลิกรัมต่อลิตร ส่งเสริมการชักนำembryogenic cell suspension โดยได้ปริมาตรตะกอนเซลล์ 2.41 มิลลิลิตร เมื่อย้าย embryogenic cell suspension เพาะเลี้ยงลงในอาหารเหลวสูตร MS ที่เติมน้ำตาลซอร์บิทอลเข้มข้น 36.434 กรัมต่อลิตร ส่งเสริมการพัฒนาโซมาติกเอ็มบริโอ 5.6 เอ็มบริโอต่อตะกอนเซลล์ 1 มิลลิลิตร เวลา 1 เดือน หลังจากนั้นนำไปตรวจสอบความแปรปรวนทางพันธุกรรม โดยใช้แคลลัส embryogenic cell suspension และ โซมาติกเอ็มบริโอ ด้วยเทคนิคอาร์เอพีดี พบว่า ไพรเมอร์ OPAB-01 , OPAB-09 , OPAB-14 และ OPT-06 ให้แถบดีเอ็นเอชัดเจน และสม่ำเสมอที่สุด โดยแถบดีเอ็นเอเป็นลักษณะ monomorphism ทั้งหมด ซึ่งไม่พบความแปรปรวนทางพันธุกรรมจากแคลลัสหรือโซมาติกเอ็มบริโอเหล่านี้